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DMEM培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基

  • 發(fā)布日期:2022-01-11      瀏覽次數(shù):1534
    •   DMEM培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于細胞停泊于一個位置生長,適于生長較快、附著較困難腫瘤細胞等。
        比較MEM和DMEM培養(yǎng)基對破骨細胞前體細胞RAW264.7分化的影響。
        方法:
        (1)根據(jù)培養(yǎng)基以及是否包括核因子2B配體的受體因子激活劑(RANKL)將細胞分組:M-MEM培養(yǎng)基組,補充AN-MEMRANKL的培養(yǎng)基組,高葡萄糖DMEM培養(yǎng)基組,高補充糖DMEM培養(yǎng)基組RANKL;
        (2)在培養(yǎng)的第三天收集細胞,并監(jiān)測與分化相關的標志物酒石酸抗性酸性磷酸酶(TRP)和qPCR以及通過Western印跡激活的T細胞的活性成分。核因子κB受體激活分裂因子(核因子1b,RANK受體衰減劑)和組織蛋白酶(組織蛋白酶)KmRNA和蛋白質表達水平以及成年成骨細胞生成成骨細胞后成骨細胞的RW47的RWAnPlastRNAKAAls。關于破骨細胞分化為M-MEM的研究和高糖的結果進行了研究。
        結果:
        (1)與添加了RANKL的高葡萄糖DMEM培養(yǎng)基相比,通過RANKL偶聯(lián)的MEM培養(yǎng)基的RAWmRNA表達水平為64.7。增加細胞中TRP,NFATC1,RANK和組織蛋白酶K,TRP,NFATC1和組織蛋白酶K的蛋白質表達水平;
        (2)通過向培養(yǎng)基或高葡萄糖DMEM培養(yǎng)基中添加R-MEM,可以將RAW264.7細胞分化為成年的破骨細胞,但是在RANKL處理的MEM培養(yǎng)基中會產生成熟細胞。更多的骨細胞。結論在RAW264.7細胞中加入RANKLM-MEM培養(yǎng)基分化為破骨細胞是有益的。